恒冷箱切片是光鏡酶組織化學(xué)中常用的佳切片
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,切片可用恒冷箱切片、組織切片機(jī)切片、振動(dòng)切片機(jī)切片和刀片手切等。 恒冷箱切片是光鏡酶組織化學(xué)中常用的佳切片。新鮮組織或固定材料在恒定的冷室、恒定的溫度下能制成厚薄均勻的、無(wú)人工假象的切片。這種切片可作為電鏡酶細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)的預(yù)試驗(yàn)和并行觀察。尤其是定量酶細(xì)胞化學(xué),一般用光鏡組織化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行定量測(cè)定,用電鏡酶細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)確定酶的定位差異,兩者結(jié)果互為補(bǔ)充。 冰凍組織時(shí).細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞間質(zhì)的溫度從冰點(diǎn)(約一2℃)到再結(jié)晶點(diǎn)(一130'C)之間會(huì)產(chǎn)生冰晶。冰晶的形成是由于大結(jié)晶吸收小結(jié)晶的水分而產(chǎn)生的。冰凍時(shí)為防止產(chǎn)生冰晶,漂洗后的固定組織可置30%蔗糖液中處理12-24h,開始時(shí)組織塊是浮的,后沉入瓶底即可置恒冷箱切片機(jī)冷凍臺(tái)上.也可用進(jìn)口的專用冷凍包埋劑處理,效果更好。在冷凍臺(tái)的組織里液氮中速凍10min,待組織塊溫度與冷室溫度達(dá)到平衡時(shí)切片。冷凍時(shí)常用液氮或其它冷凍劑。固定組織塊冷凍后,由于組織塊過(guò)度變硬,溫度低于一20℃時(shí)傷刀,要升高箱內(nèi)溫度至合適溫度。
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